在冷凍電鏡技術中，樣品冷凍質量直接決定最終成像分辨率。投入冷凍法（Plunge Freezing）作為很常用的冷凍固定技術，以其操作簡便、成本低廉的優勢，成為單顆粒分析的方法。

投入冷凍技術原理

投入冷凍技術通過將樣品載網直接投入-196℃的液態乙烷/丙烷中，實現超高速冷卻，使樣品中的水形成非晶態冰（玻璃態冰）而非破壞性的六方晶冰。

關鍵步驟：

• 樣品應用：將3-5μL樣品滴在電鏡載網上

• 濾紙吸樣：用濾紙從邊緣吸除多余液體，形成薄液膜

• 快速投入：機械臂快速將載網投入液態乙烷中

• 液氮保存：將冷凍后的樣品轉移至液氮中存儲

技術優缺點分析

優勢：

• 操作簡單快速，單個樣品僅需幾分鐘

• 成本低廉，無需復雜設備

• 能夠保存表面納米結構

• 適合大批量樣品的快速制備

局限性：

• 僅能處理＜200nm超薄層樣品

• 厚樣品內部易形成冰晶

• 需要優化樣品濃度和緩沖條件

• 對樣品均勻性要求較高

  
  

適用樣品類型

投入冷凍技術特別適合以下樣品：

• 病毒顆粒（流感病毒、新冠病毒等）

• 蛋白質溶液（膜蛋白、復合體等）

• 脂質體及納米顆粒

• 核糖體及其他大分子復合物

• 單層細胞及細胞器懸液

手動 vs. 自動投入冷凍對比表

Leica EM GP2自動投入冷凍儀：

精準控制的冷凍專家

全自動機械控制和環境參數可編程設計，有效解決手動操作的不確定性問題。其內置的溫濕度控制艙（4-60℃, 濕度最高99%）能有效防止樣品溶液揮發，確保實驗條件的高度重復性。

Leica EM GP2 可調整二次冷凍劑溫度，在實現快速液化的同時，可定義不同的冷凍溫度，獲得更佳的冷凍結果。

應用案例展示

病毒顆粒

微管

細菌

細胞

核心功能：

• 環境參數可調：溫度（4-60℃）和濕度（最高99%）精確控制

• 過程全自動：從吸濾到投入全程程序化操作

• 冷凍劑溫度可調：快速液化，且可實現特定溫度冷凍

• 高重現性：確保每個樣品獲得一致的冷凍條件

• 防污染設計：封閉式工作艙避免環境污染

• 用戶友好：觸摸屏控制，操作簡單易學

該儀器特別適合病毒學研究和蛋白質結構分析，能夠大幅提高樣品制備成功率和數據質量，是單顆粒分析研究的理想選擇。

選擇正確的冷凍方法，

讓您的電鏡研究事半功倍！

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